發(fā)布時(shí)間: 2023-06-23 點(diǎn)擊次數(shù): 1017次
病毒提取是從樣品中分離和純化病毒顆粒的過程。在進(jìn)行病毒檢測(cè)、診斷或生物學(xué)研究時(shí),必須首先將樣品中的病毒提取出來。
常見的病毒提取方法包括:
1. 冷凍-融解法:通過反復(fù)冷凍和融解樣品使細(xì)胞壁裂開,并釋放出其中的核酸和蛋白質(zhì)。這種方法適用于大多數(shù)RNA and DNA 病毒,如流感、乙肝等。
2. 高速離心法:利用差異性離心沉淀來富集和分離不同大小的顆粒,可以有效地分離出許多類型的病毒。此方法可采用低速(3000g),也可選擇高速(100,000g)。
3. 化學(xué)溶解法:使用一些化學(xué)試劑如三甲基氧硫釕(TMSC) 以及十二名歐洲人(DDM)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行溶解并釋放出內(nèi)部成份,在較少量梯度中對(duì)其進(jìn)行分層
4. 聚合物共沉淀法: 利用聚合物與固體相親性抑制劑結(jié)合,使得有機(jī)相濃度較高,從而使得病毒顆粒沉降。此法較為便捷但需要多步操作。
在進(jìn)行病毒提取時(shí)需要注意以下事項(xiàng):
1. 安全措施:由于病毒會(huì)對(duì)人體造成危害,所以在進(jìn)行病毒提取前必須嚴(yán)格遵守相關(guān)的生物安全規(guī)定和操作程序。例如要戴上防護(hù)手套、口罩等個(gè)人保護(hù)裝備;將樣品處理在專門的實(shí)驗(yàn)室中,并按規(guī)定處理廢棄物。
2. 樣品收集:選擇合適的樣品采集方法,確保采集到足夠數(shù)量和質(zhì)量的細(xì)胞或組織樣本。注意避免污染和損傷。
3. 保存條件:不同類型的病毒有不同的保存條件,在進(jìn)行提取前必須了解并確定好其最佳保存條件,如溫度、pH值、緩沖液等。
4. 提取方法:針對(duì)不同種類和來源的病毒,選擇合適有效率高、純度高而且易于實(shí)施的提取方法,并注意操作技巧及優(yōu)化各步驟流程。
5. 實(shí)驗(yàn)設(shè)備與試劑:使用高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)下具有水平認(rèn)證資質(zhì)(如ISO9001) 的設(shè)備與試劑來保證分析結(jié)果準(zhǔn)確性以及良好可重復(fù)性
6. 防止交叉污染:為避免樣品之間的交叉污染,應(yīng)采取一系列嚴(yán)格的措施來保證實(shí)驗(yàn)操作和設(shè)備干凈。如對(duì)于每個(gè)樣品使用不同的操作器具、阻隔等手段以及定期消毒等。
總之,在進(jìn)行病毒提取時(shí)需要注意安全性、合適性和規(guī)范性,并按照國家相關(guān)法規(guī)要求進(jìn)行操作。
針對(duì)不同的樣品和病毒類型,選擇合適的提取方法可以提升提取效率,并獲得更純凈、穩(wěn)定的病毒樣本。